Visa alla biokemiska tester

Katalas-test

Katalas-test

Katalastest
A. Applicera en droppe 3% väteperoxid på ett objektglas.
B. Överför bakterier med hjälp av en plastögla till H2O2 -lösningen.
C. En katalas positiv bakterie ger gasbildning (O2) i form av bubblor
D. En katalas negaitiv bakterie ger ingen gasbildning. Notera att det finns fragment av bakteriekolonier, men inga bubblor i lösningen.
- Klicka på bilden för att förstora den.

Allmän information

Många aeroba bakterier och de flesta som är fakultativt anaeroba producerar enzymet katalas, som ingår i bakteriernas enzymsystem för avgiftning av H2O2 (väteperoxid). H2O2 bildas från superoxidradikalen med hjälp av enzymet superoxiddismutas. Många syretoleranta bakterier har peroxidas (som inte är samma enzym som cytokrom c oxidas) i stället för katalas. Obligata anaerober saknar både superoxiddismutas och katalas.

Katalas innehåller en hemgrupp vid den aktiva ytan och följande reaktion katalyseras med ett mycket högt omsättningstal (turnover number):

2 H2O2 → 2 H2O + O2

Metodik

  1. Sprid bakterier på en agarplatta och inkubera den över natten (18-24 tim) vid lämpliga betingelser.
  2. Applicera en droppe 3% H2O2 på ett objektglas. Var försiktig med H2O2 som är frätande !!! Samla upp bakterier från en koloni, med en plast- eller platinaögla och applicera dem på ett objektglas.
  3. Om bakterierna tas från en blodplatta måste man undvika att få med agar, eftersom hemoglobinet också innehåller hemgrupper, som kan ge upphov till en falskt positv reaktion.
  • Positivt testresultat: Gasbildning (O2) i form av bubblor visar att bakterien har katalas.
  • Negativt testresultat: Ingen gasbildning.

Användning

Katalastestet används huvudsakligen för grampositiva bakterier och kan t.ex. utnyttjas för att skilja Staphylococcus spp. och Micrococcus spp., som är katalaspositiva från Streptococcus spp. respektive Enterococcus spp. som är katalasnegativa.

Upp­da­te­rad: 2017-12-20.


Senast uppdaterade

Senaste blogginlägg


Sveriges lantbruksuniversitet