VetBact

Fylum	Klass	Ordning	Familj	Genus	Art/Underart

Visa alla biokemiska tester

Kaliumhydroxidtest

Kaliumhydroxidtest.
A. Applicering av kaliumhydroxidlösning på objektglas.
B. Bakterier överförs och blandas med KOH-lösningen.
C. Resultat med gramnegativa bakterier där vätskan blir viskös och man kan se DNA-tråden.
D. Resultat med grampositiva bakterier där vätskan inte blir viskös.
Klicka på bilden för att förstora den.

Allmänt

Syftet med kaliumhydroxidtestet (KOH testet) är att identifiera gramnegativa bakterier. KOH löser upp det tunna peptidoglykanlagret i cellväggen hos gramnegativa bakterier, men påverkar inte cellväggen hos grampositiva bakterier. Lyseringen av cellväggen hos gramnegativa bakterier innebär att innehållet inklusive DNA frigörs. Frisläppt DNA gör lösningen viskös, fastnar på plastöglan och blir tråddragande. Cellväggen hos grampositiva bakterier påverkas inte av KOH, då de har ett tjockare peptidoglykanlager. Detta medför att cellen inte lyserar och inget DNA frigörs och lösningen blir inte viskös.

Material

Objektglas
Plastögla
3% KOH

Metod

Applicera en droppe 3% KOH på objektglaset
Överför en välfylld ögla med bakteriematerial (odlade 24-48 tim) till objektglaset med KOH
Blanda väl
Gramnegativa bakterier blir viskösa och tråddragande inom 30 sek
Använd positiva och negativa kontroller

Positivt resultat: Lösningen med bakterier (gramnegativa) blir viskös

Negativt resultat: Lösningen med bakterier (grampositiva) blir inte viskös

Användning

Syftet med KOH testet är att snabbt skilja mellan gramnegativa och grampositiva bakterier som ett komplement till Gramfärgning. Testet är inte användbart för anaeroba bakterier.

Uppdaterad: 2017-12-20.